- 湖南匯百益新材料有限公司
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- 品牌：匯百試劑
- 產(chǎn)地：湖南
- 貨號：HBY0209
- cas：367-93-1
- 發(fā)布日期： 2024-03-19
- 更新日期： 2025-01-09
| 產(chǎn)地 | 湖南 |
| 品牌 | 匯百試劑 |
| 貨號 | HBY0209 |
| 用途 | 生物基礎原材料 |
| 包裝規(guī)格 | 按需包裝 |
| CAS編號 | 367-93-1 |
| 純度 | 99% |
| 是否進口 | 否 |
中文名： 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷( IPTG)
英文名稱： Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside
用途： 異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)是一種作用極強的誘導劑,不被細菌 代謝而十分穩(wěn)定,因此被實驗室廣泛應用。IPTG 常用于需要誘導 β-半乳糖苷酶活性的克隆實驗。它常與 X-Gal 或 Bluo-Gal 結(jié)合使用，用于重組細菌菌落的藍白篩選，這些菌落可以誘導 lac 操縱子在大腸桿菌中的表達。IPTG 與 lacI 阻遏蛋白結(jié)合并改變其構(gòu)象而發(fā)揮作用，防止 β-半乳糖苷酶編碼基因 lacZ 的抑制。
使用方法： 首先把IPTG配制成23.83 mg/ml(100 mM)的水溶液，并進行過濾除菌后保存。然后在100 ml的瓊脂 培養(yǎng)基中，加入100 μl的上述溶液、200 μl的X-Gal(20 mg/ml的二甲基甲酰胺(DMF)溶液)和100 μl的Amp(100 mg/ml)，制作成IPTG、X-Gal、Amp平板培養(yǎng)基。當DNA片段插入至pUC系列載體(或其他帶有l(wèi)acZ、Amp基因載體)，然后轉(zhuǎn)化至lacZ缺失細胞中后，涂布上述的IPTG、X–Gal、Amp平板培養(yǎng)基，可根據(jù)長出菌體的藍白色，而方便地挑選出基因重組體(白色為具有DNA插入片段的基因重組體)。
配制方法： 在8ml蒸餾水中溶解2g IPTG后，用蒸餾水定容至10ml，用0.22μm濾器 過濾除菌，分裝成1ml小份貯存于-20℃。
優(yōu)點：
1.能誘導酶的合成，但又不被分解的分子，稱為安慰誘導物。由于乳糖雖可誘導酶的合成，但又隨之分解，產(chǎn)生很多復雜的動力學問題，因此人們常用安慰誘導物來進行各種實驗。
2.IPTG不被菌體代謝，為乳糖類似物，一旦進入細胞就會產(chǎn)生持續(xù)長久的誘導效果，所以IPTG的誘導效率高，往往只需要很少量(1mmol/L)即可達到理想誘導效果。由于IPTG不被代謝，在胞內(nèi)專一誘導外源蛋白的表達。不受的影響，誘導效果持續(xù)穩(wěn)定。乳糖有雙效作用，既能做為誘導劑異乳糖的前體物質(zhì)，又可以做碳源，在誘導過程中，很不穩(wěn)定，IPTG因其優(yōu)異的穩(wěn)定性決定了它適合做實驗研究用。
3.IPTG能在缺乏lacY基因下而有效地被抄送。
4.半乳糖苷鍵中用硫代替了氧，失去了水解活性，但硫代半乳糖苷和同源的氧代化合物與酶位點的親和力相同，IPTG雖不為β–半乳糖苷酶所識別，但它是lac基因簇十分有效的誘導物。
注意事項： 培養(yǎng)噬菌體時，Top agar中的添加量為：25 μl/3 ml(24 mg/ml)。含有
IPTG 的培養(yǎng)基4℃避光保存，須在1~2 周內(nèi)使用。
保存： 2-8°C冷藏保存，配制好后保存于-20°C，室溫可放置一個月。遠離熱源及氧化劑。
湖南匯百益提供十四烷基三甲基溴化銨CAS:1119-97-7的研發(fā)、生產(chǎn)和銷售，50000平源頭實力廠家，庫存充足，可定制，可寄樣品，如您需要采購相關(guān)產(chǎn)品或需要了解相關(guān)技術(shù)問題，歡迎撥打網(wǎng)站上電話與我們聯(lián)系！
